Sekundärantikörper oder ein sekundärer Antikörper ist ein Antikörper, der verwendet wird, um an die Immunglobulindomäne (IgG) des primären Antikörpers zu binden. Der sekundäre Antikörper wird spezifisch für die Spezies und den Isotyp des primären Antikörpers sein, in Anwendungen wie Immunblotting oder Immunzytochemie. Mehrere Antikörper können an den gleichen primären Antikörper binden, der die Empfindlichkeit erhöht und das Signal verstärkt.

Antikörper werden in der Regel mit Indikatormolekülen, Enzymen wie HRP oder Fluorophoren wie APC konjugiert, um den Nachweis der primären Antikörper durch Fluoreszenz, Kolorimetrie oder Chemilumineszenz zu ermöglichen. Vorteile von sekundären Antikörpern Sie werden zur indirekten Detektion eines Targets verwendet, an das zuerst ein spezifischer primärer Antikörper bindet.

Sekundärantikörper müssen sowohl für die Antikörperspezies als auch für den Isotyp des verwendeten primären Antikörpers spezifisch sein. Darüber hinaus weist ein sekundärer Antikörper in der Regel ein nachweisbares Etikett oder einen anderen Marker auf, der den Nachweis oder die Reinigung erleichtert. Der indirekte Nachweis des Zielantigens mittels Proteinen erfordert mehr Schritte als der direkte Nachweis mittels primärer Antikörper.

Antikörper mit Spezifität für primäre Antikörper von gemeinsamen Spezies sind im Handel erhältlich, vorkonfiguriert mit einer Vielzahl von gemeinsamen Markern, einschließlich Enzym- und Fluoreszenzkonjugationsoptionen.

Die meisten primären Antikörper werden in Mäusen oder Kaninchen produziert; daher sind Anti-Maus-IgG und Anti-Karnen-IgG die beliebtesten Arten von Proteinen. Die Ziege ist die von den Herstellern am häufigsten verwendete Wirtsart zur Herstellung von polyklonalen Anti-Maus- und Anti-Karnen-Sekundärantikörpern.

Wofür werden sie verwendet?